Бромелаин ензимски прахје ензимски систем који хидролизује протеине присутан у висећим биљкама ананаса. Има широк спектар употребе у прехрамбеној и фармацеутској индустрији. Међутим, његова слаба стабилност утиче на његову примену, посебно у фармацеутској индустрији. У овом раду су проучавани утицаји влажних услова температурних услова и „Цои радијације на протеазу ананаса са сировином фармацеутске протеазе ананаса.
1 Материјали и методе
1.1 Сировине бромелаина
Бромелаин ензимски прах
1.2 Утицај влажне средине
Измерени и испуштени ензим је отворено стављен у затворени ексикатор (собна температура). Силика гел, НаК засићени раствор и КНО, засићени раствор су стављени у ексикатор. Релативна влажност унутрашњег окружења била је 0,1 проценат (75±1) проценат 2,92 процената, а узорци су узимани у редовним интервалима да би се утврдила активност ензима.
1.3 Утицај температуре
Измерени и порционисани ензими су постављени на температуре од 1~4 степена, 29 степени и 55 степени респективно, а узорци су узимани периодично за одређивање активности ензима.
1.4 Третман зрачењем
Измерени и распоређени ензими су херметички затворени у пластичним (ПВЦ) центрифугалним епруветама. Узорци су озрачени "Цои зрачењем" на собној температури (~20 степени). Брзина дозе је била 198 кГи/х, а апсорбоване дозе су биле 4 кГи8 кГи и 12 кГи. 3 дана након озрачивања узорака одређена је активност ензима и укупан број бактерија.
1.5 Метода одређивања
Бромелаин је одређен ФИП методом. Тирозин хидролизован из казеина је квантификован УВ спектрофотометром и процењена је активност ензима. Казеин је коришћен као супстрат и хидролизован протеазом ананаса.
Укупан број бактерија је одређен методом бројања колонија на плочи.
2 Ресултс
2.1 Утицај услова влажности на складиштење бромелаин ензима у праху
Резултати утицаја услова влажности на складиштење бромелаина приказани су у табели 1. Као што се види у табели 1, активност ензима бромелаина била је релативно стабилна у сувом окружењу. Брзина инактивације ензима је убрзана са повећањем влажности околине. У касној фази експеримента, активност ензима је значајно смањена у условима високе влажности. Само 40,4 процента 14,4 процента ензимске активности је остало након 105 д и 315 д складиштења бромелаина, респективно. Док је очување активности ензима било 80,3 посто и 80,0 посто под релативном влагом (75 плус 1) посто.
Из приложене слике може се видети да је под сувом или ниском влажношћу. До инактивације протеазе ананаса дошло је у раним до касним фазама очувања, али је изједначено. То је због чињенице да је влажност ензима већа од влажности околине у раној фази конзервирања. Већа влага даје одређену флексибилност ензимској структури. Конформација активног центра ензима је склона промени. Када ензим достигне равну улицу са сувим окружењем, влага ензима се смањује и активност ензима тежи да се стабилизује. На слици се такође може видети да се активност ензима смањује у окружењу са високом влагом. Разлог за то је самохидролиза протеазе, поред високе влаге која повећава флексибилност структуре ензима.
2.2 Утицај температурних услова на складиштење биљног бромелаин ензима у праху
Табела 2 приказује налазе истраживања о томе како температура утиче на складиштење протеазе ананаса. Протеазе ананаса су инактивиране и на високим и на ниским температурама, као што је приказано у табели 2, при чему су високе температуре биле мање стабилне. Њихова стопа инактивације била је бржа у раној фази складиштења и умеренија у каснијој фази. Стопа очувања ензима после 285 дана на 51 степен (68.0 процената) била је већа од оне после 105 дана при високој влажности (40,4 процената). У овом случају, ефекат температуре на ензим био је много мањи од утицаја влаге. Утицај температуре на ензим био је много мањи од утицаја влаге.
2.3 Утицај зрачења 60Цор на активност протеазе ананаса и бактерицидни ефекат
Резултати ефекта зрачења 60Цор на активност протеазе ананаса и ефекат стерилизације приказани су у табели 3. Као што се види у табели 3, губитак активности ензима био је 10,6 процената, 11,0 процената и 15,5 процената када је апсорбована доза је била 4 кГи 8 кГи, односно 12 кГи. Њихови ефекти стерилизације били су упоредиви са 99,9 процената, 100 процената и 100 процената, респективно. Да би се минимизирао губитак активности ензима, доза од 4 кГи или 8 кГи може се одабрати у складу са преношењем извора ензима. Као количина фунгицида, и стерилизација, и смањење губитка активности ензима
3 Дискусија
У овом експерименту, осетљивост ензима на влажност била је већа од оне на температуру. Стопа преживљавања ензима у окружењу за сушење силика гела била је боља од оне на ниској температури, а стопа инактивације ензима у окружењу високе влажности била је знатно већа од оне испод 55 степени. Окружење високе влажности повећало је садржај влаге у ензима и постало главни фактор инактивације ензима. Ово је уско повезано са самохидролизом протеазе ананаса. Зато у производњи посебну пажњу треба обратити на влажност средине у којој се ензим чува и сувоћу самог ензима. Поред тога, постоји инактивација ензима када се "Кои зрачење користи за стерилизацију протеазе ананаса. Како даље побољшати стабилност очувања и стерилизације бромелаина? стерилизациона стабилност протеазе ананаса. Потребна су даља истраживања како би се одабрали ефикасни адитиви, који би били најбољи начин да се побољша стабилност чувања и стерилизације бромелаин ензимског праха.адитиви ће бити једно од средстава.
Гуањие обезбеђује расути бромелаин ензимски прах, користећи ГДУ тест метод. Наш производни процес функционише у оквиру ЦГМП стандардних радионица, користећи три производне линије у две фабрике и две независне лабораторије. За сва питања у вези са нашим производима, контактирајте нас наinfo@gybiotech.com.
